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      實驗室設計
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      PCR實驗室設計標準及規范

      作者:科藝普實驗室設計集團 來源:www.kaamini4u.com 時間:2022-07-14 11:29:49 閱讀:

      [導讀]:PCR實驗室通常采用非單向流送風方式,所謂非單向流,指氣流流線方向不平行,風速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側回式、測送下回式、上送上回式、PCR實驗室一般采用上送下回式。上部送風依靠高效送風口進入房間,下部回風依靠每個房間的對稱分布的排風柱下部的排風口排風。

       PCR實驗室通常采用非單向流送風方式,所謂非單向流,指氣流流線方向不平行,風速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側回式、測送下回式、上送上回式、PCR實驗室一般采用上送下回式。上部送風依靠高效送風口進入房間,下部回風依靠每個房間的對稱分布的排風柱下部的排風口排風。

       目前PCR應用已得到長足的發展,已成為疫病診斷,疫情控制等方面的有力工具,為了避免在PCR方法中出現污染及出現假陽性和假陰性結果等現象,保證結果的準確性,在實驗室環境安全控制上嚴格做到實驗室獨立區域設計,功能分區明確,保證實驗室潔凈環境,人流物流嚴格分流,設計合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,切實做到避免交叉污染。

       PCR是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡稱,是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。

       避免污染是PCR實驗室設計建設首要考慮重點

       由于PCR技術的高度敏感性,PCR技術要求高、影響因素多,從樣品制備到結果的產生,任何一處細微的失誤均會造成結果的偏差,導致樣品的假陽性和假陰性結果。

       PCR實驗室研究過程中,很多操作都會產生氣溶膠,比如離心、混勻等操作閔。為保證環境安全,PCR實驗室設計建設需獨立區域設計,避免與其余環境的交叉混雜,下面SICOLAB根據我們做過的工程實例從平面布局、凈化區域劃分,人物流設計和壓差控制等方面具體介紹。

       一丶PCR實驗室區域劃分

       1、功能劃分

       試劑準備區、標本制備區、擴增反應一區、純化區、擴增反應二區、后純化區(如上布局圖)。

       2、SICOLAB設計原則

       按國家衛生部的要求,各實驗區域必須是相互獨立的,不能直通,每個獨立實驗區設有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進入各工作區域必須嚴格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準備區,標本制備區,擴增反應一區,純化區,擴增反應二區到后純化區,避免發生交叉污染。

       3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設計為10萬比較。閘間(緩沖間)設計為正壓區,保證與外界環境隔離,避免從鄰近區域進入本區域的氣溶膠污染。

       二、氣流設計

       人流物流設計各行其道,避免交叉混雜,整個區域設計一個公用走廊,工作區域之間設計試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。

       1、物流:在試劑準備區與標本制備區、標本制備區與PCR擴增區之間,以及擴增區域和純化區之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本制備區,處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區傳遞到PCR擴增區,按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環境。

       2、人流:人員通過閘間分別進入各自實驗區域,進出各實驗區域需要在閘間區域更換潔凈工作服,手消毒等。

       三、壓差設計

       PCR實驗室應設計為負壓潔凈室,通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產物對人員和環境的污染。

       各個實驗室與非潔凈區之間的閘間保持正壓,>10Pa,實驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準備區空氣流向閘間,標本制備區流向閘間,而PCR擴增區氣流方向由閘間流向PCR擴增區,純化區同理;

       同時按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設計不同壓力梯度來實現單向氣流組織方向,由試劑準備區(+20Pa)、標本制備區(+15Pa)、擴增反應一區(-5Pa)、純化區(-10Pa)、擴增反應二區(-20Pa)、到后純化區(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。

       四、其它安全設施

       PCR實驗室為潔凈空調系統,系統形式采用直流系統不回風,防止交叉污染;試劑準備間設計超凈臺,保證試劑免受空氣環境污染;標本制備間設計生物安全柜,保證標本不污染室內環境,并保證標本免受環境污染。

      版權聲明:本文由科藝普小編整理編輯發布,本文地址: http://www.kaamini4u.com/xwzx/1515.html,本文標題:PCR實驗室設計標準及規范, 轉載請注明出處!

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